Leadmium? Green AM dye 铅离子（镉离子）绿色荧光探针

订购信息：

以上产品均为Life（Invitrogen）原装正品，我司（懋康生物）对A10024进行拆开销售，特惠价为900元/支，单支50μg，现货销售，欢迎订购。

【温馨提示】：见我司整理的金属离子【钙，钾，钠，锌，镁，氯，铅离子】荧光染色探针产品专题。

基本介绍：

Leadmium? Green AM dye（铅离子/镉离子绿色荧光探针）是Life旗下品牌Molecular Probe的专利产品，是一种独特的工具用来高度特异性和高灵敏度的检测细胞内铅离子（lead）和镉（cadmium）水平。当溶液内铅离子和镉离子测定的标准实验建立后，这一独特的Leadmium? Green AM探针能特别设计用来检测活细胞内这些有毒的环境污染重金属。

产品特点

1） 高特异性探针（指示剂）用来检测细胞内铅和镉水平；

2） 灵活的检测方式，适用于流式细胞仪、荧光显微镜成像和荧光酶标板检测；

3） 明亮的荧光和高度鉴别镉离子，能检测到纳摩尔（nM）水平的铅离子和微摩尔（μM）水平的镉离子；

4） 检测方便，只需用488nm激光激发即可；

5） 探针轻易加载进入细胞，进入细胞内经酯酶水解后能极好的保存在细胞内。

产品保存

一旦收到本品，置于≤-20℃保存。一旦配制，Leadmium? Green AM dye溶液（in DMSO）请在一天内用完。

实验前试剂准备

1、需要的材料（自行准备）

生理盐水（0.85% NaCl）【不能使用PBS】; DMSO（高质量，无水，如Cat#：MS4601-100mL）

2、 其他试剂（自行准备）

PbCl2溶液；CdCl2溶液；TPEN（tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine）；乙醇；

离子霉素钙盐（货号：MZ2152-1MG）；死细胞染料比如碘化丙啶（Cat#：MX4205-10MG）。

3、 试剂准备

3.1 从冰箱内取出一管Leadmium? Green AM dye（50 μg），让其回温到室温，避光保存。

3.2 往管子内加入50μl 高质量无水的DMSO（Cat#：MS4601-100mL），避光混匀，使其充分溶解。

3.3 用生理盐水按照1：10的比例将Leadmium? Green AM dye的DMSO储存液稀释成工作液（比如取20μl 储存液加到180μl生理盐水，混匀），所有溶液制备过程一直避光。

3.4 37℃温育生理盐水，用于后续多个步骤的清洗过程。

3.5 【可选】如果此实验需要设置相对对照（用已经浓度的PbCl2处理细胞），建议PbCl2的起始浓度范围是1nM-625nM。制备625nM PbCl2【添加250μl 10μM PbCl2到3.75ml生理盐水。然后做9次连续性梯度稀释最终得到1nM PbCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。

3.6 【可选】如果此实验需要设置相对对照（用已经浓度的CdCl2处理细胞），建议CdCl2的起始浓度范围是1μM-250μM。制备250μM CdCl2【添加1ml 1mM CdCl2到3ml生理盐水。然后做8次连续性梯度稀释最终得到1μM CdCl2】。37℃保存这些溶液直到需要。每个浓度需要1ml量。

3.7 【可选】制备10mM TPEN工作液，通过添加1.2ml无水乙醇到5mg TPEN?；煸?，室温保存。

操作流程【流式分析，具体leadmium Green AM dye Manual】

应用实例：

Figure 1. Dual-color scatter plot showing two populations. Jurkat cells were loaded with Leadmium? Green AM dye and washed. The sample was then incubated in the presence of 1 μM PbCl2 (in saline) and 1 μM ionomycin. After washing the sample, it was incubated in the presence of PI. Dual-color fluorescence was collected using 488 nm excitation and 525/10 nm and 610/10 nm bandpass filters. This results in visualization of two populations: dead cells (positive for PI) and live cells that contain lead (positive for Leadmium? Green dye and negative for PI).

发表文献（A10024）：

Cellular sequestration of cadmium in the hyperaccumulator plant species Sedum alfredii. PubMed ID: 22025609

A new ABC half-transporter in Leishmania major is involved in resistance to antimony.  PubMed ID: 23716044

Increased nuclear thioredoxin-1 potentiates cadmium-induced cytotoxicity. PubMed ID: 22961094

 — —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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