Peroxidase (POD), Grade II，from horseradish

（辣根过氧化物酶 HRP，Grade II）

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Peroxidase from Horseradish 辣根过氧化物酶；HRP；过氧化物酶 POD；抗体偶联；免疫球蛋白；CAS：9003-99-0；

辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase，HRP，EC 1.11.1.7），一种含四个二硫键的单链多肽，也是一种由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白，含18% 碳水化合物。碳水化合物的组分包括半乳糖，阿拉伯糖，木糖，海藻糖，甘露糖，甘露糖胺和半乳糖胺，取决于同工酶类型。

HRP能快速结合过氧化氢（H2O2）产生HRP- H2O2复合物，其可氧化大量的氢供体，反应式为：Donor + H2O2→ Oxidized Donor + 2 H2O。过氧化物酶可氧化各种底物，包括生色底物、化学发光底物（鲁米诺和异鲁米诺）和荧光底物（酪胺，高香草酸和对羟基苯乙酸）。

辣根过氧化物酶（HRP）普遍用于标记许多不同免疫化学实验用的免疫球蛋白，包括ELISA，免疫印迹，免疫组化?；鼓芡ü钢植煌椒ㄅ剂娇固迳?，有二硫键介导的戊二醛交联，过碘酸氧化法；还有氨基和巯基直接介导的交联。HRP是最理想的抗体标记酶，因为在三种最受欢迎的标记酶（HRP，β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶AP）中，HRP不仅分子量最小和最稳定，而且糖基化使HRP产生更低的非特异性结合。

一、POD（Grade II）的应用

POD（Grade II）在许多诊断测试的指示反应中用来氧化还原性染料，比如，血糖、甘油三酯、乳汁内的血糖测定。也是一种标记酶，用于酶联免疫实验（EIA）。

二、POD（Grade II）的特性

1）CAS NO：9003-99-0

2）英文同义名：Peroxidase (POD), from horseradish; Horseradish peroxidase; HRP; Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase;

3）中文同义名：辣根过氧化物酶；过氧化物酶，来自辣根；氢供体-过氧化氢氧化还原酶；

4）分子量：40kDa

5）等电点：7.2

6）速率常数：氢受体【H2O29 x 108 [L x mol-1 x s-1]；methyl peroxide 1.5 x 106 [L x mol-1 x s-1]；ethyl peroxide 3.6 x 106 [L x mol-1 x s-1]】；氢供体【许多】

7）抑制剂：叠氮钠，氰化物，L-胱氨酸，重铬酸盐，亚乙基硫脲，羟胺，硫化物，钒酸盐，对氨基苯甲酸，Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+, and Pb2+

8）激活剂：氨、吡啶、咪唑（pH>7.0）能加速邻联茴香胺的过氧化

9）最佳pH：6.0-6.5

10）热稳定：高达40℃

11）特异性：过氧化物酶特异性识别氢受体，仅H2O2，甲基和乙基过氧化物有活性。但是，其不能特异性识别氢供体，许多酚类、氨基酚类、二胺类、白细胞染料、抗坏血酸和几种氨基酸都能与其反应。

12）外观：红-棕色冻干粉

13）溶解性：溶于水（10mg/ml），透明、红棕色溶液

14）pH (c=10mg/ml)：6.6-7.6

15）活性：≥200 U/mg lyophilizate

16） 纯度值：RZ=2.0~3.5。RZ（Reinheitszahl）代表过氧化物酶纯度值，为溶于去离子水中的酶（0.5–1.0 mg/ml）的吸光度比值A403/A275。

17）污染物：ATPase: ≤0.001；Catalase: ≤0.7；Phosphatase, acidic: ≤0.001；Contaminating oxidases: ≤0.00005；

18）稳定性：2-8℃干燥，2年

酶的性能表现：

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